紫外-可見分光光度計的應用功能及注意事項介紹

紫外-可見分光光度計是基于紫外可見分光光度法原理，利用物質分子對紫外可見光譜區的輻射吸收來進行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強度的、穩定的連續光譜。紫外光區通常用氫燈或氘燈.見光區通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發出的復合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種?？梢姽鈪^的測量用玻璃吸收池，紫外光區的測量須用石英吸收池。檢測器的功能是通過光電轉換元件檢測透過光的強度，將光信號轉變成電信號。常用的光電轉換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測器。分光光度計的分類方法有多種：按光路系統可分為單光束和雙光束分光光度計；按測量方式可分為單波長和雙波長分光光度計；按繪制光譜圖的檢測方式分為分光掃描檢測與二極管陣列全譜檢測 。

分光光度計的基本原理是建立在光與物質相互作用的基礎上,當光子和某一溶液中吸收輻射的物質分子相碰撞時,就發生吸收,測量其吸光度值的大小可反映某種物質存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關系,這就是著名的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光(單一波長光)照射樣品。

為了使該定律具有良好的線性,對測量濃度有一定的范圍要求。也就是吸光度值控制在0.2～0.7之間,并且要求單色光垂直照射樣品,試樣要均勻。一臺性能優良的分光光度計,必須有一個高性能的光路系統即單色儀。單色儀有兩類:一類是以玻璃三棱鏡為色散元件組成;另一類是由光柵為色散元件組成。兩種單色儀各有利弊,用石英玻璃做成的單色儀,在紫外光區有較高的色散率,波長精度較高,分辨率可達0.2nm,但在可見光區要大于2nm,波長精度不線性,像751G型分光光度計,是由光柵做成的單色儀,在全段波長(200nm～800nm)之間具有相同的波長精度。但目前大部分光柵或分光光度計所用的光柵都是復制光柵,波長精度不太高,如754、722、752型分光光度計,波長精度在±2nm。

紫外分光光度計的工作波長在200～1000nm之間，其波長范圍涵蓋紫外光（200～400nm）、可見光（400～750nm）及近紅外光（750～1000nm）。在紫外光區（200～350nm）測定時必須用石英杯。

注意事項

1.開機前將樣品室內的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。

2.比色皿內溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔，池壁上液滴應用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。

3.測定時，禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟，要盡可能及時清理干凈。

4.實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。