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液相色譜柱的產(chǎn)品種類介紹

更新時(shí)間:2022-04-25      點(diǎn)擊次數(shù):2533
在選擇色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱
2. 如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))
3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留
4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡(jiǎn)單,缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來(lái)分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類
①常規(guī)分析柱(常量柱),內(nèi)徑2~5mm,柱長(zhǎng)10~30cm;
②窄徑柱(narrowbore),內(nèi)徑1~2mm,柱長(zhǎng)10~20cm;
③毛細(xì)管柱(又稱微柱microcolumn),內(nèi)徑0.2~0.5mm;
④半制備柱,內(nèi)徑>5mm;
⑤實(shí)驗(yàn)室制備柱,內(nèi)徑20~40mm,柱長(zhǎng)10~30cm;
⑥生產(chǎn)制備柱內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。
色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外,還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下,填料粒度>20um時(shí),干法填充制備柱較為合適;顆粒<20um時(shí),濕法填充較為理想。填充方法一般有四種:
①高壓勻漿法,多有用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充;
②徑向加壓法,Waters**;
③軸向加壓法,主要用于裝填大直徑柱;
④干法,柱填充的技術(shù)性強(qiáng),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用己填充好的商品柱。
須指出,高效液相色譜柱的獲得,裝填技術(shù)是重要環(huán)節(jié),但根本問(wèn)題還在于填料本身性能的優(yōu)劣,以及配套的色譜儀系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)是否合理。 
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